2010年生物化學(xué)輔導(dǎo)講義:氨基酸的序列分析
更新時間:2010-08-06 09:33:08
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多肽鏈中氨基酸序列分析
a.分析純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成
(蛋白質(zhì)水解為個別氨基酸,測各氨基酸的量及在蛋白質(zhì)中的百分組成)
↓
測定肽鏈頭、尾的氨基酸殘基
二硝基氟苯法(DNP法)
頭端 尾端 羧肽酶A、B、C法等
丹酰氯法
↓
水解肽鏈,分別分析
胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)法:水解芳香族氨基酸的羧基側(cè)肽鍵
胰蛋白酶法:水解賴氨酸、精氨酸的羧基側(cè)肽鍵
溴化脯法:水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鍵
↓
Edman降解法測定各肽段的氨基酸順序
(氨基末端氨基酸的游離α-氨基與異硫氰酸苯酯反應(yīng)形成衍生物,用層析法鑒定氨基酸種類)
b.通過核酸推演氨基酸序列。
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