2010年生物化學(xué)輔導(dǎo)講義:蛋白質(zhì)分離與轉(zhuǎn)化
更新時間:2010-08-06 09:31:54
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蛋白質(zhì)的分離和純化
1、沉淀
2、電泳:蛋白質(zhì)在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據(jù)支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。
4、層析:
a.離子交換層析,利用蛋白質(zhì)的兩性游離性質(zhì),在某一特定PH時,各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同,故可以通過離子交換層析得以分離。如陰離子交換層析,含負電量小的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來。
b.分子篩,又稱凝膠過濾。小分子蛋白質(zhì)進入孔內(nèi),滯留時間長,大分子蛋白質(zhì)不能時入孔內(nèi)而徑直流出。
5、超速離心:既可以用來分離純化蛋白質(zhì)也可以用作測定蛋白質(zhì)的分子量。不同蛋白質(zhì)其密度與形態(tài)各不相同而分開。
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