2018年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試重要考點：蛋白質沉淀方法
更新時間：2018-05-07 13:53:04
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2018年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試重要考點：蛋白質沉淀方法
1.鹽析：在蛋白質溶液中若加大量中性鹽，蛋白質膠粒的水化層即被破壞，其所帶電荷也被中和，蛋白質膠粒因失去這兩種穩(wěn)定因素而沉淀。此種沉淀過程稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。鹽析沉淀的蛋白質不發(fā)生變性是其優(yōu)點，缺點是沉淀的蛋白質中混有大量中性鹽，必須經透析除去。
2.重金屬鹽沉淀蛋白質：重金屬離子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等，可與蛋白質的負離子結合，形成不溶性蛋白質沉淀。沉淀的條件為pH稍大于蛋白質的pI為宜。
3.生物堿試劑與某些酸沉淀蛋白質：生物堿試劑如苦味酸、鞣酸、鎢酸等以及某些酸，如三氯醋酸、磺酸水楊酸、硝酸等，可與蛋白質的正離子結合成不溶性的鹽沉淀。沉淀的條件是pH﹤PI. 4)有機溶劑沉淀蛋白質：可與水混合的有機溶劑，如酒精、甲醇、丙酮等能與蛋白質爭水，破壞蛋白質膠粒的水化膜，使蛋白質沉淀析出。在常溫下，有機溶劑沉淀蛋白質往往引起變性。
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