2013檢驗主管技師考試臨床化學：免疫化學法測定個別蛋白質(zhì)

更新時間：2012-11-05 09:14:55 來源：|0

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　　散射比濁法和透射比濁法由于測定方法簡便、快速而被廣泛使用。許多試劑盒供應抗血清及標準蛋白質(zhì)，即可建立此測定法。此技術(shù)可以測定抗原-抗體復合物(沉淀顆粒)形成的量(終點法)，亦可采用測定復合物形成的速率(動力學方法，即通過散射濁度計測定抗原-抗體混合反應復合物顆粒形成的時間，即反應速率。一定條件下，反應速率與反應體系中抗原的含量直線相關(guān)，可以通過制備標準曲線而計算)。

　　現(xiàn)已有設(shè)計完善的帶微電腦進行數(shù)據(jù)處理的散射濁度計和透射濁度計，以免疫化學系統(tǒng)(immuno-chemicalsystem,ICs )可供應。免疫擴散法不需昂貴設(shè)備，放射免疫法則需要液體閃爍計數(shù)器及應用放射性同位素。

　　現(xiàn)將幾種常用的免疫化學測定法的特點列表總結(jié)比較于表2-9、10中。

　　表2-9　電泳與免疫化學檢測血清蛋白列表比較

法）	各種免疫化學分析法
前白蛋白	前白蛋白
白蛋白	白蛋白
α1球蛋白（區(qū)帶）	α1抗胰蛋白酶
	α1酸性糖蛋白
	α1脂球蛋白
	α1脂蛋白
	甲狀腺激素結(jié)合球蛋白，皮質(zhì)醇結(jié)合蛋白
α2球蛋白（區(qū)帶）	結(jié)合珠蛋白
	α2巨球蛋白
	銅藍蛋白
	前β脂蛋白
β球蛋白（區(qū)帶）	轉(zhuǎn)鐵蛋白
	血紅素結(jié)合蛋白
	補體C4，C3
	β2微球蛋白
γ球蛋白（區(qū)帶）	IgG，A，M，D，E
	C反應球蛋白

　　表2-10　幾種免疫化學測定方法的比較

度	準確性	檢測時間
散射比濁法　10mg/L	批內(nèi)CV值<5%	幾分鐘（動力學法）
		1小時?。ńK點法）
透射比濁法　20-30mg/L	批內(nèi)CV值5%-10%	1小時內(nèi)
免疫擴散法　>20mg/L	批間CV值5%-15%	1-2天
放射免疫法 μg/L	批內(nèi)CV值5%-10%	幾小時

　　關(guān)于免疫化學測定方法中的標準品和方法的標準化問題：含有準確含量的純抗原蛋白不易買到。制備的抗血清由于其來源不同，其特異性和靈敏度效價有很大差異，一個純蛋白制劑來制備高特異性的抗血清亦非輕易之舉。因此抗血清的制備和方法的標準化是方法推廣和使用的關(guān)鍵。據(jù)美國病理學會的研究報告，測 α1AT用同一標本，使用5種不同的方法在510個實驗室報告的結(jié)果從1.6-2.34g/L。同一研究中C3補體的測定采用了8種不同方法，測定結(jié)果為 149-282mg/L。

　　世界衛(wèi)生組織目前提供以下參考標準品：IgG 、IgA、IgM、IgD、IgE、αFP、CEA、Alb、C3、CER及TRP。使用國際單位(IU)，沒有使用絕對的質(zhì)量單位。美國疾病控制中心(CDC)供應的國家參考標準品人血清蛋白質(zhì)含13種蛋白質(zhì)，亦使用WHO的國際單位標明含量。

　　由于不易獲得穩(wěn)定的抗血清和標準化的參考蛋白質(zhì)，各個實驗室還不得不根據(jù)自己的條件建立自己的正常參考值。

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