主管檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　主管檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù) $lesson$

　　紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　方法學(xué)評(píng)價(jià) 手工顯微鏡法 傳統(tǒng)方法

　　血液分析儀法 常用

　　質(zhì)量控制 手工方法：樣本、操作、器材、固有誤差

　　[參考值] 成年男性：(4.0～5.5)×1012/L

　　成年女性：(3.5～5.0)×1012/L

　　初生兒：(6.0～7.0)×1012/L

　　1、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理和方法、參考值及臨床意義

　　改良Neubauer(牛鮑)計(jì)數(shù)板構(gòu)造：兩個(gè)計(jì)數(shù)室，計(jì)數(shù)室兩側(cè)各有一條支柱，比計(jì)數(shù)室高0.1mm,將計(jì)數(shù)專用蓋玻片覆蓋其上時(shí)，蓋玻片底面與計(jì)數(shù)室表面形成0.1mm的間隙。

　　每個(gè)計(jì)數(shù)室邊長(zhǎng)為3mm，劃成長(zhǎng)寬均為1mm的9個(gè)大方格，面積為1mm2，加蓋片后容積為0.1mm3。每個(gè)計(jì)數(shù)室四角上的四個(gè)大方格用單線劃成16個(gè)中方格，用于白細(xì)胞計(jì)數(shù);中央大方格用雙線劃成25個(gè)中方格，其中位于4角的四個(gè)和中間一個(gè)共5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)，每個(gè)中方格又用單線劃成16個(gè)小方格。

　　2、計(jì)數(shù)原理：

　　(1)手工顯微鏡法 用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞，經(jīng)換算求出每升血液中紅細(xì)胞數(shù)量

　　(2)血液分析儀法 利用電阻抗和(或)光散射原理

　　3、方法：

　　顯微鏡計(jì)數(shù):將血液標(biāo)本用等滲稀釋液稀釋后，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池，在高倍鏡下，計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)池中央大方格中4個(gè)角中方格和中央1個(gè)中方格的紅細(xì)胞數(shù)，再換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。

　　稀釋液：①赫姆(Hayem)稀釋液：主要成分有氯化鈉(調(diào)滲透壓)、結(jié)晶硫酸鈉(提高相對(duì)比密和防止細(xì)胞粘連)、氯化高汞(防腐劑)。②甲醛枸櫞酸鹽稀釋液：其中氯化鈉起調(diào)滲透壓的作用，枸櫞酸鈉抗凝和維持滲透壓，甲醛固定紅細(xì)胞和防腐。③生理鹽水用于急用時(shí)。

　　4、計(jì)數(shù)注意事項(xiàng)：

　　(1)標(biāo)本：必須新鮮、采血量準(zhǔn)確、吸血要快、放血要慢。充液過多、多次充液、產(chǎn)生氣泡或充液后蓋片移動(dòng)，均可使細(xì)胞分布不均，使計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。血液發(fā)生凝固，如取血?jiǎng)幼骶徛?、或用力擠壓使混入組織液、或吸管內(nèi)殘余酒精均可影響計(jì)數(shù)結(jié)果。

　　(2)混勻：混勻時(shí)避免氣泡過多

　　(3)計(jì)數(shù)器材如試管、定量吸管、計(jì)數(shù)板均須清潔。

　　(4)壓線細(xì)胞遵循數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的原則

　　5、常見計(jì)數(shù)誤差：包括計(jì)數(shù)誤差和固有誤差

　　(1)計(jì)數(shù)誤差：操作不正規(guī)或使用器材不精確造成。如使用器材不符合要求，如未校準(zhǔn)的計(jì)數(shù)板、蓋玻片不平整等;采血部位不當(dāng);稀釋倍數(shù)不準(zhǔn);充液不當(dāng);血液凝固。

　　(2)固有誤差(計(jì)數(shù)域誤差)：因每次充液后細(xì)胞在計(jì)數(shù)室內(nèi)分布不可能完全相同所造成，可隨細(xì)胞計(jì)數(shù)增多而減小但不能消除。

　　例：現(xiàn)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤稱為：

　　A.牛巴氏計(jì)數(shù)盤

　　B.老牛巴氏計(jì)數(shù)盤

　　C.新牛巴氏計(jì)數(shù)盤

　　D.改良牛巴氏計(jì)數(shù)盤

　　E.Miller氏窺盤

　　答案：D

　　6、臨床意義：

　　(1)生理性變化

　　a.年齡與性別差異：

　　新生兒：2周后逐漸下降

　　兒童：男性兒童6～7歲時(shí)最低，然后隨年齡增大上升，25～30歲達(dá)高峰，

　　此后逐漸下降

　　女性兒童13～15歲達(dá)高峰，然后受月經(jīng)、內(nèi)分泌等影響逐漸下降，21～35

　　歲最低，然后逐漸增高與男性相近。因此在15～40歲之間兩性紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

　　差別最大?？赡芘c睪酮促進(jìn)紅細(xì)胞造血有關(guān)。

　　b.精神因素：興奮、激動(dòng)、恐懼、冷水浴等伴隨腎上腺素增多，可導(dǎo)致紅細(xì)胞暫時(shí)性增多。

　　c.劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)：相對(duì)缺氧引起促紅細(xì)胞生成素生成增加，骨髓加速釋放紅細(xì)胞。

　　d.氣壓降低：缺氧刺激紅細(xì)胞代償增生，高海拔地區(qū)。

　　e. 妊娠中、后期血液稀釋使紅細(xì)胞減少;6個(gè)月～2歲嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育迅速導(dǎo)致造血原料相對(duì)缺乏;某些老年人造血功能明顯減退等

　　(2)病理性變化：

　　a.紅細(xì)胞和血紅蛋白減少：最常見于各種原因的貧血。按照病因，可將貧血分成三大類

　　①急性、慢性紅細(xì)胞丟失過多：如各種原因的出血，見于消化性潰瘍、痔瘡、十二指腸鉤蟲病等

　　②紅細(xì)胞壽命縮短：如各種原因的溶血

　　紅細(xì)胞膜缺陷：球形細(xì)胞增多癥;遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥;口形紅細(xì)胞增多癥;棘形紅細(xì)胞增多癥;陣發(fā)睡眠性血紅蛋白尿

　　紅細(xì)胞酶缺陷：如無氧酵解途徑紅細(xì)胞酶缺陷如丙酮酸激酶缺陷，缺乏磷酸戊糖旁路或谷胱甘肽代謝所需酶，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶變異等。

　　血清中抗體或補(bǔ)體影響：自體免疫溶血貧，藥物誘發(fā)溶血貧、血型不合輸血致溶血等機(jī)械損傷：微血管病性溶血貧，行軍性血紅蛋白尿，創(chuàng)傷性心源性溶血貧血

　　化學(xué)、物理、生物因素：化學(xué)毒物及藥物引起溶血、大面積燒傷、感染、溶血性蛇毒

　　脾臟內(nèi)阻留：脾亢

　?、奂t細(xì)胞生成減少：

　　造血干細(xì)胞和造血微環(huán)境損害：再障

　　紅系祖細(xì)胞、幼紅細(xì)胞或紅細(xì)胞生成素的免疫破壞：純紅再障

　　骨髓被異常組織或細(xì)胞浸潤

　　DNA合成障礙 如葉酸、B12缺乏導(dǎo)致的巨幼貧

　　紅細(xì)胞生成素產(chǎn)生障礙 如慢性疾病(炎癥、腎功不全)

　　血紅素合成障礙 如缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、鉛中毒性貧血。

　　珠蛋白合成障礙 如鐮形細(xì)胞性貧血、血紅蛋白C、D、E病、珠蛋白生成障

　　礙性貧血

　　b.紅細(xì)胞增多：

　　原發(fā)紅細(xì)胞增多：真性紅細(xì)胞增多癥，良性家族性紅細(xì)胞增多癥等

　　繼發(fā)性紅細(xì)胞增多：見于各種引起低氧血癥的疾病如各種先心病(室缺、法四)、肺疾病(肺氣腫、肺心病、肺纖維化)、異常血紅蛋白病、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)等。藥物如腎上腺素、糖皮質(zhì)激素、雄激素可引起紅細(xì)胞數(shù)的增加

　　相對(duì)性紅細(xì)胞增多：由于血液水分的丟失如嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、多汗、多尿、大面積燒傷、等引起血液濃縮

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