初級檢驗技師考試輔導:酶免疫測定的應用

　　初級檢驗技師考試輔導:酶免疫測定的應用

　　酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性，幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測。它的最小可測值達ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比，酶免疫測定的優(yōu)點是標記試劑比較穩(wěn)定，且無放射性危害。因此，酶免疫測定的應用日新月異，酶免疫測定的新方法、新技術不斷發(fā)展。但酶免疫測定在醫(yī)學檢驗中的普及應歸功于商品試劑盒和自動或半自動檢測儀器的問世。酶免疫測定步驟復雜，試劑制備困難。只有用符合要求的試劑和標準化的操作，才能獲得滿意的結果。

　　商品ELISA試劑盒中應包含包被好的固相載體、酶結合物底物和洗滌液等。先進的試劑盒不僅提供全部試劑成分，而且所有試劑均已配制成應用液，并在各種試劑中加色素，使之呈現(xiàn)不同的顏色。ELISA操作步驟多，所需試劑也多，這種有色試劑既方便操作又有利于減少操作錯誤。ELISA所有儀器除定量測定中必需的出色儀(專用的稱為ELISA測讀儀)外，洗滌板也極有用。洗滌機的使用不僅省時省工，而且也利于操作標準化，對中小型實驗室是實用且易于接受的。但應注意在采用洗板機前，應先對洗板機的性能加以檢定，確認各孔的洗滌效果是否徹底，且重復性好。

　　半自動和自動化ELISA分析儀亦趨成熟，并在大中型臨床檢驗實驗室中取得應用。自動化ELISA分析儀有開放系統(tǒng)(open system)和封閉系統(tǒng)(close system)兩類。前者適用于所有的96孔板的ELISA測定;后者只與特定試劑配套使用。

　　免疫滲濾試驗和免疫層析試驗具有簡便、快速、單份測定、可立等結果等優(yōu)點，無需任何儀器設備，試劑穩(wěn)定，因此多用于急診檢驗。這類試驗不能準確定量，所以主要限于檢測正常體液中不存在的物質(如診斷傳染病的抗原或抗體)以及正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(如hCG等)。目前臨床檢驗中已開展的項目有hCG、抗HCV和抗HIV、HBsAg等，新項目正在不斷發(fā)展中。

　　均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質的檢測。ELISA則應用更為廣泛，可用以檢測的項目包括以下幾個方面：

　　1.病原體及其抗體廣泛應用于傳染病的診斷.。病毒肝炎病毒、風疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等;細菌如鏈球菌、結核分枝桿菌、幽門螺桿菌和布氏桿菌等;寄生蟲如弓形體、阿米巴、瘧原蟲等。

　　2.蛋白質各種免疫球蛋白、補體組分、腫瘤標志物(如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原等)、各種血漿蛋白質、同工酶(如肌酸激酶CK-MB)、激素(如hCG、FSH、TSH)。

　　3.非肽類激素如T3、T4、雌激素、皮質醇等。

　　4.藥物和毒品如地高辛、苯巴比妥、慶大霉素、嗎啡等。

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