初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：硝酸鹽還原試驗(yàn)

　　初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：硝酸鹽還原試驗(yàn)

　　硝酸鹽還原試驗(yàn)

　　(1)原理：硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程：一是在合成代謝過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其它含氮化合物;二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。硝酸鹽還原過程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌等;有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨;有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如沙雷菌屬;有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中完全利用。

　　(2)培養(yǎng)基：硝酸鹽培養(yǎng)基。

　　(3)方法：將待檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基(內(nèi)含小倒管)中，35℃孵育1~4d。將甲、乙等量混合液(用時(shí)混合)(約0.1ml)加于試管內(nèi)，立即觀察結(jié)果。

　　(4)結(jié)果：出現(xiàn)紅色為陽性反應(yīng)。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗(yàn)陰性;②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質(zhì)而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉，如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色，表明試驗(yàn)為假陰性。

　　若要觀察是否有氮?dú)猱a(chǎn)生，可于培養(yǎng)基管內(nèi)加1只小導(dǎo)管，有氣泡產(chǎn)生，則表示有氮?dú)馍伞?/p>

　　(5)應(yīng)用：本試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌屬均可產(chǎn)生氮?dú)?有些厭氧菌如韋榮菌等試驗(yàn)也為陽性。

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